Comment les enzymes de restriction sont-elles utilisées lors de l'électrophorèse sur gel ?
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Anonim

1 réponse. Pour couper l'ADN, l'ARN ou le plasmide à restriction sites (comme EcoRI, BamHI, hindIII et BglII) pour créer des fragments génétiques plus petits qui peuvent être séparés et ainsi caractérisés en utilisant électrophorèse sur gel.

De même, on peut se demander quel est le rôle des enzymes de restriction ?

UNE Enzyme de restriction est une protéine qui reconnaît une séquence nucléotidique courte et spécifique et ne coupe l'ADN qu'à ce site spécifique, appelé restriction site ou séquence cible. Dans les bactéries vivantes, fonction des enzymes de restriction pour défendre la cellule contre l'invasion des bactériophages viraux.

Aussi, comment savoir quelle enzyme de restriction utiliser ? Lors de la sélection des enzymes de restriction, vous souhaitez choisir des enzymes qui:

  1. Flanquez votre insert, mais ne coupez pas à l'intérieur de votre insert.
  2. Se trouvent à l'emplacement souhaité dans votre plasmide destinataire (généralement dans le site de clonage multiple (MCS)), mais ne coupez pas ailleurs sur le plasmide.

A côté de cela, comment les enzymes de restriction sont-elles utilisées dans la recherche ?

Dans le laboratoire, les enzymes de restriction (ou endonucléases de restriction ) sommes utilisé pour couper l'ADN en fragments plus petits. Les coupes sont toujours effectuées à des séquences nucléotidiques spécifiques. Différent les enzymes de restriction reconnaître et couper différentes séquences d'ADN.

Quel est le rôle de l'électrophorèse sur gel ?

Électrophorèse sur gel est une technique utilisée pour séparer les fragments d'ADN en fonction de leur taille. Les échantillons d'ADN sont chargés dans des puits (indentations) à une extrémité d'un gel , et un courant électrique est appliqué pour les tirer à travers le gel . Les fragments d'ADN sont chargés négativement, ils se déplacent donc vers l'électrode positive.

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