BamHI peut-il être inactivé par la chaleur ?
BamHI peut-il être inactivé par la chaleur ?

Vidéo: BamHI peut-il être inactivé par la chaleur ?

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Vidéo: AP Biology: Restriction Enzyme Digests on Circular Plasmids 2024, Novembre
Anonim

Bien que NdeI pouvez être inactivé par la chaleur , BamHI -HF ne peut pas.

De cette façon, comment désactiver BamHI ?

Chaleur inactivation a été effectuée comme suit pour se rapprocher d'une expérience typique. Un mélange réactionnel de 50 µl contenant le NEBuffer approprié, 0,5 µg d'ADN de thymus de veau et 5 ou 10 µl d'endonucléase de restriction (à la concentration de vente) a été incubé à 37°C pendant 60 minutes puis à 65°C ou 80°C pendant 20 minutes.

De même, quel est le site de restriction pour BamHI ? BamHI . Restriction l'endonucléase BamH I liée à un ADN non spécifique. BamH I (de Bacillus amyloliquefaciens) est un type II restriction endonucléase, ayant la capacité de reconnaître de courtes séquences (6 pb) d'ADN et de les cliver spécifiquement au niveau d'une cible placer.

À cet égard, dois-je chauffer l'enzyme de restriction pour inactiver ?

Inactivation de restriction endonucléases n'est généralement pas nécessaire , mais dans certains cas, cela pourrait augmenter l'efficacité de la transformation.

Qu'est-ce que l'inactivation thermique ?

Chaleur - inactivation ( chauffage à 56°C pendant 30 minutes) est fait pour inactiver complément, un groupe de protéines présentes dans les sérums qui font partie de la réponse immunitaire. Chaleur a également été utilisé pour détruire les mycoplasmes dans le sérum.

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